实习一 血液检查
血液常用检验项目有：红细胞沉降速率（血沉）、血红蛋白含量及红细胞压积的测定，红细胞计数、白细胞计数及其分类计数等。
一、血液的采取与抗凝
采血的部位和方法根据检验项目、所需血量和动物种类的不同，可分为毛细血管采血法、静脉采血法和心脏采血法。
【毛细血管采血法】常用血液检验项目中除血沉测定和红细胞压积测定需较多量的血液外，其他各项测定用血量较少，均可在耳尖、耳缘及耳静脉处按毛细血管法采血。采血前，先将局部剪毛，要尽量剪短，再用酒精棉球消毒，待酒精挥发、干燥后，用消毒的干燥针头迅速刺入消毒部位约2～3mm深，让血液自然流出。如血液不易流出时，可在刺入部的上方稍加按压，但勿用力强挤，以免混入过多的组织液。开始流出的第1滴血，可用于制作血片；然后用干棉球擦去局部的剩余血液，利用重新流出的第2滴血液作红、白细胞计数和血红蛋白测定；若利用第3滴血液时，仍然要将第2滴血液的剩余部分擦干，使局部皮肤干燥，否则以后流出的血液易分散，不能形成滴状，不易吸取。对犬、猫等小动物耳缘采血时，可在局部剪毛、消毒后，涂布一层凡士林，然后在局部刺入，流出的血液易成滴状，便于吸取。利用毛细血管血液时，取血动作要迅速，可做多项测定，如果操作不熟练，动作缓慢往往引起血液凝固。利用毛细血管血液作多项测定时，一般应先作红细胞计数测定，后作血红蛋白或白细胞数测定。
【静脉采血法】马、牛、羊可由颈静脉采血（具体部位和方法，见注射法部分）。猪可由前腔静脉采血（详见注射法部分）。鸡可由翼下静脉采血，即用细针头刺入翼下静脉后，任血液自行流出并将其接入试管中。犬、猫可利用小腿外侧跖背外侧静脉或前臂内侧皮下静脉。局部剪毛消毒后，用止血带扎住采血部上端或由助手握住采血部位近心端，使静脉怒张，用消毒、干燥的注射器接上针头，针头斜面向上，先以约30度角穿刺静脉前2～3mm处的皮肤，然后再穿刺静脉壁入静脉腔，待见有血液流入注射筒内后，将针头顺势向静脉腔内推入少许，以防动物骚动时针头滑出静脉。用右手食指将针头固定，左手慢慢抽血，抽血时不可过分用力，以免引起溶血。待抽至所需血量后，先放松止血带，再用消毒棉球按住伤口，拔出针头。除去注射器上的针头，将血液沿管壁缓缓注入清洁的试管内。需抗凝血液时，试管内应加抗凝剂，并立即混匀，以免凝固。
【心脏采血法】多用于鸡及实验动物需多量血液时。鸡可由胸腔入口处向心脏刺入，刺入心脏时，由于心腔压力较静脉高，血液可自然涌入注射器，兔及鸡等亦可在左侧胸部第1、2肋间，摸到心搏动明显处，针头与胸壁呈垂直方向缓缓刺入，针头进入心腔内时，血液可自然进入注射器。
【血清快速分离法】如需迅速分离血清（特别对牛），可将盛血管放入离心机内，以2,500r/min的速度离心3min，使红细胞与血浆分离，然后放入37℃温箱内30min促使血块加速凝固、收缩，可迅速分离到较多的血清。
【血液抗凝法】供检血最好采取后随即进行检验。若不能立即检验，为防止血液凝固，可加入抗凝剂，并应充分混合之。常用的抗凝剂有：
（1）草酸钠 是最常用的抗凝剂，为白色粉末状，每1.5～2.0mg可抗凝1.0ml血液，可用于血液常规检验。但因其对红细胞大小有影响，故不能用作红细胞压积测定，如需测定红细胞压积时，可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。
（2）双草酸盐抗凝剂
草酸钾 0.8g
草酸铵 1.2g
蒸馏水 加至100.0ml
溶解后，吸取0.5ml，加于供采血用的试管或小瓶中，置干燥箱内（温度不能超过80℃），烘干备用（实际含双草酸盐10mg，可供5ml全血抗凝用）。
（3）3.8％枸橼酸钠溶液 主要用于血沉测定时的抗凝。
（4）乙二胺四乙酸二钠（EDTA二钠）每10mg可使5ml全血抗凝；或配成10％溶液，每2滴可使5ml全血抗凝。
怀疑传染病时，采血过程应防止到处流散，检后的残余血液及所用器皿亦应进行消毒处理。
二、红细胞沉降速率（血沉）测定
血沉测定是在室温条件下观察抗凝血液内，红细胞于一定时间中的沉降速度。测定血沉，常用的方法有两种：
1.魏（Westergren）氏法
【器械】
（1）特制的血沉管为长30cm、内径2.5mm的毛细玻管，管上有由0～200的刻度，每一刻度间的距离为lmm，带刻度部分全长为20cm，其容积为1ml；并附有特制的血沉管架。
（2）定时钟。
（3）5ml刻度试管（或5ml注射器）。
【试剂】3.8％枸橼酸钠溶液。
【方法】先用刻度试管装入3.8％枸橼酸钠溶液1.0ml，再自静脉采血4.0ml（总容量至5.0ml处），充分混合后，将此枸橼酸钠血液吸入血沉管至“0”刻度处，擦去管外血液，在室温条件下，垂直放于血沉管架上并记录时间。经15、30、45、60min，观察红细胞的沉降数值并记录之。
（正常值）依本法所测得的健康家畜的血沉值，见表五：
表五 健康家畜血沉数值（魏氏法）
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家畜种类 |
15min |
30min |
45min |
60min |
|
马
黄牛、奶牛、绵羊、山羊
水牛 |
40～60
35 |
70～90
70 |
90～120
90 |
110～1255
0.5～1.0
110 |
2、“六五”型血沉管法（本法需血量较多，主要用于马的大群检疫）
【器械】“六五”型血沉管，内径0.9cm，全长17～20cm，其容积约为l0ml的部分，刻有100个刻度。
【方法】测定时，于血沉管中先加入抗凝剂（草酸钠0.015～0.02g，或枸橼酸钠粉末0.04～0.05g）；自颈静脉直接采血至刻度“0”处，立即充分混合；垂直放置，经15、30、45、60min各观察一次，，分别记录其红细胞沉降的数值。
【正常值】各种健康家畜依本法测得的正常值，见表六-：
表六 健康家畜血沉正常值（“六五”型血沉管法）
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家畜种类 |
15min |
30min |
45min |
60min |
|
马
骡
黄牛、奶牛、绵羊、山羊
水牛 |
30～35
23
－
10 |
45～50
47
－
30 |
50～55
52
－
－ |
55～60
54
1.0以内
65 |
【注意事项】
（1）测定血沉时必须用新制备的抗凝血。
（2）采血及盛血容器（包括血沉管），均需清洁、干燥。
（3）采血过程宜迅速，血流应通畅。
（4）血液与抗凝剂应充分混合，以防凝血；振荡时并应尽量防止产生气泡。
（5）用魏氏法测定时，事先应检查血沉管架是否好用，以防漏血。
（6）血沉管应垂直放立。
（7）室温以20℃左右为宜。
【临床意义】
血沉加快：可见于各种类型的贫血及重度溶血性疾病，当马传染性贫血，梨形虫病时尤为明显；某些发热病、感染性疾病及广泛性炎症时，如结核、活动性鼻疽、猪瘟、化脓性炎症等亦可见之；在风湿症时血沉也加快。
血沉减慢：常见于严重脱水（大出汗、多尿、剧烈腹泻）、马骡的某些腹痛、破伤风等时。马的流行性脑脊髓炎时，血沉极为缓慢，是一个重要的特征。
三、血红蛋白含量测定
红细胞遇酸溶解，游离出血红蛋白，并被酸化为褐色的酸性血红素；稀释后与标准色柱比色，即可求得血红蛋白的含量。
【器械】国产的萨利氏血红蛋白计，通常以100ml血液中含血红蛋白14.5g定为100％。其测定管的两侧有刻度，从下往上，一侧为2～24的刻度，表示l00ml血液中含有血红蛋白的克数；另一侧有20～160的刻度，表示血液中血红蛋白的百分数。但各种不同牌号的血红蛋白计颇不一致，有低至以13.8g作为100％者；也有以高达17.6g作为100％者，故如以其他牌号血红蛋白计进行测定时，应注明所用测定管之标准，或为求统一，均以“g％”表示为宜。其血红蛋白吸管上常有容积为10及20mm3的两个刻度。
【试剂】0.1mol/L（或1～2％）盐酸溶液。
【方法】
（1）于测定管内加入0.1mol/L（或1％）盐酸溶液至百分数刻度的“20”处（约5～6滴）。
（2）用血红蛋白吸管吸取供检血液至20（或10）mm3处；用清洁脱脂棉或纱布拭净血红蛋白吸管尖端外壁附着的血液；迅速将血红蛋白吸管插入测定管底部的盐酸溶液中，缓缓压出血液，并以此盐酸溶液反复洗净管内所附着的血液。
（3）以玻棒充分搅拌，使供检血与盐酸溶液充分混合，静置l0min。
（4）沿管壁向测定管内逐滴加入蒸馏水（或0.1mol/L盐酸溶液亦可），随加随以玻棒搅拌，并与两侧的标准色柱相比较，直至管内液体的颜色与标准色柱一致为止。
（5）读取测定管内液体凹面的刻度数，即为l00ml血液中所含血红蛋白的克数或百分数。如检血用量为血红蛋白吸管的刻度“10”处时，应将读数2倍之。
【注意事项】
（1）吸血量应准确，血红蛋白吸管中的血柱不应混有气泡。
（2）供检血液及稀释用盐酸溶液均应沿测定管壁加入，勿使直接冲向管底而产生大量气泡。
（3）搅拌要均匀，防止血液发生凝块。
（4）稀释时蒸馏水应分次、逐滴加入，勿使液体颜色淡于标准色柱而无法比色。
（5）混合完毕；应于l0min后，30min内进行比色。因在室温下，lmin后约有75％的血红蛋白可与盐酸作用而呈褐色；5min后有88％，至l0min时，95％的血红蛋白才能转化为褐色的酸性血红素。
（6）如测定管系由有机玻璃制成者，禁用有机溶剂（如酒精）洗涤；烘干时温度也不应高于60℃。
【正常值】健康家畜血红蛋白含量值见表七：
表七 健康家畜血红蛋白含量值
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家畜种类 |
血红蛋白值（g/100ml） |
家畜种类 |
血红蛋白值（g/100ml） |
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马、骡
牛
水牛 |
11.0（9.0～13）
10.0（9.0～11.0）
8.3（8.0～9.0） |
羊
猪
鸡 |
9.8（7.8～11.6）
10.5（9.5～12）
12.5（10.0～14.5） |
【临床意义】
血红蛋白含量增多：见于各种原因引起的血液浓缩，如腹泻、呕吐、大出汗及某些中毒等。
血红蛋白含量降低：是各型贫血的特征，如马传染性贫血、牛血红蛋白尿病、梨形虫病及仔猪贫血等；亦可见于各种慢性消耗性疾病，如马鼻疽、牛结核、牛及羊的肝片形吸虫病、仔猪蛔虫病等。
如用“六五”型血沉管测血沉时，经放置2h以上（最好经一昼夜）后，可读取由20～125的一侧刻度的血柱高的刻度数，而概略地表示出血红蛋白的百分单位数。由于不甚精确，只可供为参考。为准确目的，应用血红蛋白计法测定之。
四、红细胞计数
红细胞计数是将一定量供检血经一定倍数稀释后，计算其一定容积内的红细胞数，并换算为每立方毫米血液内的含量。
红细胞计数时血液的稀释方法有试管法和吸管法两种。目前临床上因使用和洗涤方便，多采用试管法。
【器材】
（1）血红蛋白吸管 吸血用，与测定血红蛋白者通用。
（2）血细胞计数板 不仅用于红细胞计数，亦可作白细胞、血小板等计数用。计数板种类甚多，原理相似。目前一般常用者为牛鲍氏和改良牛鲍氏。计数板为特制的厚玻片，上面刻划有计数室两个。每个计数室分9个大方格，大方格每边长度为lmm，每1大方格的面积为lmm2。加盖片后的深度为1/10mm。计数室四角的大方格，每格又等分为16个中方格，用于白细胞计数。中央大方格用双线划分为25个中方格，每个中方格又等分为16个小方格，共计400个小方格，用于红细胞计数。
（3）血盖片 为血细胞计数板专用盖玻片，呈长方形，厚度为0.4mm。
（4）5ml管
（5）小试管（75mm×l0mm）
【稀释液】
（1）0.9％氯化钠溶液。
（2）台（Dacie）氏液：
3％枸橼酸钠液 99ml
36％中性甲醛 lml
（3）复方氯化钠稀释液（海姆氏液）：
氯化钠 1.0g
结晶硫酸钠 5.0g
氯化汞 0.5g
蒸馏水 200.0ml
石炭酸品红溶液 数滴
【方法】
（1）取小试管1支，先以普通吸管准确吸取红细胞稀释液4.0ml（按理应加3.98ml）放于试管中。
图5 红细胞计数的中格区及计数顺序
（全黑者计入；空圈者不计入） |
（2）稀释血液 用血红蛋白吸管准确吸取供检血液至20mm
3处（也可将稀释液和供检血液均取其半量），用干脱脂棉拭去管尖外壁附着的血液；然后将血红蛋白吸管插入已装稀释液的试管底部，缓缓放出血液；再吸取上清液反复洗净附在吸管内壁上的血液数次；立即振摇试管1～2min，使血液与稀释液充分混合，即得200倍的稀释血液。
（3）充液 取清洁、干燥的计数板和血盖片。将血盖片紧密覆盖于血细胞计数板上；并将血细胞计数板置显微镜镜台上，用低倍镜先找到计数室；然后用小吸管取已摇匀的稀释血液一滴，使吸管尖端接触血盖片边缘和计数室空隙处，稀释的血液即可自然引入并充满计数室。
（4）计数 计数室充液后，应静置1～2min，待红细胞分布均匀并下沉后开始计数。计数红细胞用高倍镜，一般计数中央大方格中四角4个及中央1个中方格（共5个中方格），即80个小方格内的红细胞数。5个中方格内红细胞的最高和最低数相差不得超过±10％，否则表示血液稀释、混合不均。红细胞在高倍镜下呈圆形，淡黄色，发亮。为避免重复和遗漏，计数时应按一定顺序进行。对于压在线上的红细胞，每格都只计入上方和左侧线上的，而压在下方和右侧线上的红细胞则均不计入。
【计算】按下列公式进行：
每立方毫米血液内红细胞总数=x/80×400（小方格总数）×稀释倍数（200或100）×10
x为计数5个中方格（80个小方格）的红细胞数
如血液稀释200倍，为计算方便，也可将计数5个中方格（80个小方格）内的红细胞总数，乘以10,000，即得每立方毫米血液内的红细胞总数。
当用“六五”型血沉管测定血沉时，于垂直放置经2h后，依其下沉后的红细胞柱高乘以18.4万，可换算出红细胞数的大概值。如2h后红细胞柱高为35（即血沉值为65），则红细胞数为35×18.4万=644万/mm3。亦可用血沉管放置后1h的红细胞柱高换算红细胞数，但在乘以18.4万以前，应将红细胞柱高减去2刻度。如1h后红细胞柱高为37（即血沉值为63），则红细胞数为（37－2）×18．4万=644万/mm3。亦可用红细胞压积值乘以20万换算红细胞数。如红细胞压积为35，则35×20万=700万/mm3。
【正常值】健康家畜红细胞数（万/mm3）见表八：
表八 健康家畜红细胞数（万/mm3）
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家畜种类 |
平均数值 |
变动范围 |
|
马
牛（包括水牛）
绵羊
山羊
猪
鸡 |
650
600
900
1,300
600
350
- |
600～700
550～700
800～1,100
1,000～1,600
500～700
250～500 |
【临床意义】
1.红细胞增多：可见于因各种原因引起的血液浓缩，如大出汗、胸膜炎和腹膜炎的渗出
期等。
2.红细胞减少：多见于各种类型贫血，如马传染性贫血、仔猪营养性贫血、新生幼畜溶血病、牛血红蛋白尿病等。
五、白细胞计数
白细胞计数的方法也有试管法和吸管法两种，但临床上多采用试管法。
以试管法计数白细胞，其原理基本上与红细胞计数相同。但因白细胞数量少，而且必须首先破坏红细胞，故所用稀释液及稀释倍数与红细胞计数不同。
【器材】除需要1.0或0.5ml吸管外，其余同红细胞计数。
【稀释液】多用1～3％醋酸溶液。如与血红蛋白同时进行检验，亦可用1％盐酸溶液。为使白细胞核着色，便于识别，并与红细胞稀释液相区别，可于稀醋酸溶液中加入1％亚甲蓝或1％结晶紫溶液1滴。
【方法】
（1）取清洁、干燥小试管一支，以lml吸管准确吸取白细胞稀释液0.38ml，放入试管中。
（2）稀释血液 以血红蛋白吸管准确吸取供检血液至20mm3处；用干棉球擦去管尖外壁所附血液，立即将检血放入已装稀释液的试管底部；并吸取上清液反复洗净附在吸管内壁上的血液数次；然后振摇试管1～2min，使血液与稀释液充分混合，即可得20倍稀释的血液。
（3）充液 方法同于红细胞计数。
（4）计数 计数步骤均与红细胞计数时相同。但白细胞计数一般以低倍镜检视之。计数四角处4个大方格（每大方格包括16个中方格）内的白细胞总数。
（5）计算 按下式进行：
每立方毫米血液内白细胞数=x/计数之大方格数×血液稀释倍数（20或10）×10（计数室深度）
x为计数4个大方格（或计数成对角线位置上的两个大方格）内的白细胞数
如血液稀释20倍，并计数四个大方格，则白细胞总数（个/立方毫米）=x/4×20×10=x×50
【正常值】健康家畜白细胞数（个/mm3）见表九：
表九 健康家畜白细胞数（个/mm3）
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家畜种类 |
平均数值 |
变动范围 |
|
马
黄牛、奶牛
水牛
绵羊
山羊
猪
鸡 |
8,000
7,500
8,800
8,500
10,000
13,000
20,000 |
7,000～9,000
7,000～8,000
8,000～9,000
8,000～9,500
7,000～13,000
11,000～16,000
18,000～30,000 |
【注意事项】
红、白细胞计数常可由多种原因引起误差，故在操作过程中应注意以下点：
（1）器材因素
① 计数板、血红蛋白吸管等未经检定而不准确。
② 器材不清洁、未干燥，如血红蛋白吸管中有血凝块、杂质或残留有水分等。
（2）稀释液因素
① 加稀释液的数量或其浓度不准确。
② 错误地使用不适宜的血细胞稀释液。
③ 稀释液中有杂质。
（3）由于技术不准确
① 采血时针刺皮肤过浅，血滴太小，不够使用，局部过度挤压使组织液混入较多致血液被稀释。
② 吸血量不准确。
③ 操作过慢，血液已形成不同程度的凝块，使计数减低。
④ 血液与稀释液混合不均匀，致血细胞在计数室内分布不均匀。
⑤ 计数室内充液过多或过少或有空泡。
【临床意义】
白细胞增多：可见于多数细菌性感染和炎症，如猪丹毒、猪肺疫、结核、马鼻疽、马腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病时以白细胞的显著增多为其特征。
白细胞减少：主要见于某些病毒性传染病，如猪瘟、流感等；某些严重疾病的后期，机体高度衰竭时亦可见之；长期应用某些药物（如氯霉素等），也可引起白细胞减少。
六、白细胞分类计数
以百分率表示各种类型白细胞间的数量关系，称为白细胞分类计数。分类计数时需要制作血片，并进行染色。
图6.血涂片制法
1.推片放血滴前再后拉 2.向前推动推片
3.手的姿势 |
【血片的制作】取一清洁、干燥、脱脂的玻片，做为载片；另以一盖片（较厚者）或以一端光滑、平整的载片做为推片。
于动物耳尖，针刺采血。
用左手的拇指及中指挟持载片，右手持推片。
先取供检血一小滴，放于载片的一端；将推片约倾斜30～40度角，使其一端与载片接触，并放于血滴之前；向后拉动推片，使之与血滴接触，待血液扩散开之后，以均等速度轻轻向载片另一端推动，即形成一血膜；迅速自然风干，待染。
良好的血片，以薄而均匀为宜。
血片制作时应注意：血滴愈大、推片与载片角度愈大，则血膜愈厚；推片时勿过于用力，速度应均匀、适宜，中间不能停顿；血膜涂于载片中央的2/3区域内，两端稍留空隙，以便标明号码及日期；载片须彻底脱脂，并清擦干净，以防血膜中出现空泡；血液应新鲜，操作宜迅速，以防凝血，冬季注意保温，以防冻后溶血；夏季注意苍蝇舐食血膜。
【血片的固定】通常用甲醇固定，将干燥血片，置甲醇中3～5min，取出后自然干燥；亦可用乙醚与酒精等量混合液（10min）或纯酒精（20min）、丙酮液（5min）固定。
若用瑞氏法染色时，则勿需固定，因瑞氏染液中含有甲醇，在染色同时即起固定作用。
【血片的染色】通常用瑞氏或姬姆萨氏染色法。
（1）瑞氏染色法
①染液的配制：
瑞氏染色粉 0.1g
甲醇（化学纯） 60.0ml
将染色粉置乳钵中，加少量甲醇研磨，使其溶解。然后将已溶解的染液倒入洁净棕色玻瓶，剩下未溶解的染料再加少量甲醇研磨，如此反复操作，直至全部染料溶解并用完甲醇为止。将配好的染液置室温中，至少1周（每日振摇1次），即可应用。用前需将染液经过滤处理。
②缓冲液的配制：
1％磷酸二氢钾 30.0ml
1％磷酸氢二钠 20.0ml
蒸馏水 加至1,000.0ml
图7.血片的分区计数法
1.四区法 2.三区法 3.中央一区法 |
所有染料对氢离子浓度均较敏感，染色时由于酸碱度的改变，蛋白质与染料所形成的化合物可重新离解，故染色时染液的pH能够影响染色的结果。
瑞氏染色的适当pH为6.4～6.8。当染液偏于碱性时，可与缓冲液中酸基起中和作用；染液偏酸性时，可与缓冲液中碱基起中和作用；维持染色时的一定酸碱度，才能使染色结果满意。
③染色步骤：取干燥血液涂片，在血膜两端用蜡笔划线，以节省染液并防止外溢。置血片于水平的支持架上（一般可用玻璃棒或铁丝自制）。
滴加染液（量的多少由血膜大小而定），直至将血膜盖满为止。
待染1～2min后，再加1～1.5倍缓冲液，并轻轻摇动，或以口吹气，使染液和缓冲液混匀。
继续染色3～5min，用蒸馏水或常水冲洗后，将血片立于置片架上，在空气中任其自然干燥，或用清洁吸水纸将水分吸干，以备镜检。
染色时应注意：滴加染液的量勿过多或过少，过多则玻片上不能容纳而流失，造成浪费；过少时甲醇蒸发后易留下沉淀物。滴加缓冲液后，应使之与染液混匀，否则血片可发生染色浓淡不均现象。在冲洗血片时，应将载片平持，使水自玻片边缘溢出，沉渣从液面浮去，切勿先将染液倾去，以免沉淀物附着于血片上。
染色良好的血片呈樱桃红色，如呈深紫色，为染色时间过长；呈红色，为染色时间过短。
染液若过酸，可使红细胞呈鲜红色，白细胞核往往不易着色或着色很淡；若过碱，则白细胞核着色过深，故需用缓冲液加以调整。
所用缓冲液以新鲜配制者为好，如以陈旧蒸馏水代替缓冲液，需在用前将蒸馏水煮沸15～30min，待冷后使用，以除去水中碳酸。
（2）姬姆萨氏染色法
①染液的配制：
姬姆萨氏染色粉 0.5g
纯甘油（中性） 33.0m
纯甲醇（中性） 33.0ml
先将姬姆萨氏染色粉加入甘油内，置水浴加温（56～60℃）2h，使染色粉溶解；再加入甲醇，混匀，保存于棕色瓶中。1周后，用滤纸滤过即成原液。临用时，以清洁、干燥吸管吸取原液lml，加于蒸馏水l0ml中；或吸取原液1～2滴，加于蒸馏水lml中（原液中需绝对避免混入水分），配制成应用液使用。
②染色步骤：取已固定的血片，滴加姬姆萨氏应用液，至盖满整个血膜（约2m1），根据室温高低和血片厚度，染色10～30min。用蒸馏水冲洗、干燥、镜检。
染色良好的血片呈玫瑰红色。如显灰色及青灰色，表示染色液过碱；呈鲜红色，则表示染色液过酸或染色时间过短。本法所染血片，清晰鲜艳，各种白细胞易于辨别并适用作血液原虫的检查。
【血片的镜检与白细胞的分类计数】通常在血片的两端或两端的上、下部分按二区或四区计算法，有秩序地移动血片，计数白细胞总数100～200个。一般计数100个白细胞（如分二区计数，则每区计50个；分四区计数，则每区计25或50个），并按各类白细胞所占的百分数计算出其比值。
镜检一般先用低倍镜做大体上的观察，再换用油镜，边检视白细胞并计数，边移动血片而进行之。
【各类白细胞的形态和染色特征】为准确进行分类计数，在识别各类白细胞时，应特别注意：细胞的大小、形态；胞浆中染色颗粒的有无，染色及形态特征；核的染色、形态等特点。
根据胞浆中有无染色颗粒，将白细胞区分为颗粒细胞和无颗粒细胞。前者又根据其胞浆中染色颗粒的着色特征，分为嗜碱性、嗜酸性及嗜中性白细胞；后者则包括淋巴细胞及大单核细胞。
嗜碱性白细胞较大，呈圆形，或椭圆形，胞浆中有呈深紫色较小的染色颗粒。
嗜酸性白细胞较大，呈圆形或椭圆形，胞浆中有较大的呈鲜红色的染色颗粒；特以马的染色颗粒大而明显，似杨梅果状。
嗜中性白细胞中等大小，呈圆形或椭圆形，胞浆中有嗜中性的呈淡玫瑰红色的小颗粒；依其细胞核的形态特征而分为髓细胞、幼稚型、杆状核和分叶核细胞。髓细胞的细胞核色淡、着色不均，呈长圆形或豆形。
幼稚型的细胞核着色较淡，多呈肾形。
杆状核细胞的核致密、色深，弯曲呈粗细较均匀的带状、S形、马蹄形等。
分叶核细胞则其核分成2～6个分叶不等，并在各分叶间有细丝状连接为其特征。
淋巴细胞呈圆形；直径大而胞浆较多者为大淋巴细胞；直径小而胞浆较少者为小淋巴细胞。核呈深蓝紫色、圆形、致密、且常偏位；胞浆呈淡天蓝色，有时在大淋巴细胞的胞浆内有显著的嗜天青颗粒；于核的周围有淡染圈（或称透明带）；小淋巴细胞的胞浆极少，有时仅呈月牙形，位于细胞的一侧。
大单核细胞极大，呈不正、多边、多角形，胞浆呈烟灰色、较暗，核呈紫褐色，近似椭圆或不正形。
【正常值】健康家畜各类白细胞分类数值（％）见表十：
表十 健康家畜各类白细胞分类数值（％）
|
家畜种类 |
嗜碱性
细胞 |
嗜酸性
细胞 |
嗜中性细胞 |
淋巴细胞 |
大单核细胞 |
|
幼稚型 |
杆状型 |
分叶核 |
|
马
牛
水牛
猪
羊 |
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5 |
4.5
4.0
10.0
2.5
5.5 |
0.5
1.0 |
4.0
4.0
4.5
5.0
1.0 |
53.0
33.0
35.0
35.0
35.0 |
35.0
56.0
47.0
53.0
57.0 |
3.0
2.0
3.0
3.0
3.0 |
【临床意义】
（1）白细胞增多
① 嗜中性白细胞增多：见于多数细菌性传染病初期，如猪肺疫、牛出血性败血病、马腺疫等；急性炎症过程，如肺炎等；并常见于机体的化脓性感染。
② 嗜酸性白细胞增多：多见于某些寄生虫病、过敏性疾病及湿疹等。
③ 淋巴细胞增多：主要见于某些慢性传染病，如结核、鼻疽时；也可见于淋巴细胞性白血病。
④ 单核细胞增多：见于败血性疾病，某些梨形虫病（如焦虫病）及李氏杆菌病时。
（2）白细胞减少
① 嗜中性白细胞减少：可见于某些病毒性传染病；药物中毒，如长期应用某些抗生素；也可见于许多严重疾病的末期。
② 嗜酸性白细胞减少：当败血症、某些病毒病时可能减少；当显著减少时常提示预后不良。
③ 淋巴细胞减少：多为嗜中性白细胞增多而造成的相对性变化。
有时由于孤立地根据白细胞百分率的变化去分析结果，会产生错觉，所以常应计算其绝对值，即将白细胞总数乘以相应的百分比。
在分析嗜中性白细胞增、减变化时，不仅要结合白细胞总数的增、减变化，并应特别注意嗜中性白细胞的成熟情况。
嗜中性白细胞的成熟情况，以核象的变化为标志。若末梢血液中未成熟的嗜中性白细胞增多，即出现嗜中性髓细胞、幼稚型和杆状核嗜中性白细胞的比例也升高，则称为核左移。若血液内分叶核嗜中性白细胞大量增多，而且核的分叶数目也增多（大部分为4～5叶或更多分叶），则称为核右移。
严重的核左移，反映病情危重。如白细胞总数增多的同时，出现核左移，表示骨髓造血机能加强，机体处于积极防御阶段；而白细胞总数减少时见有核左移，则标志骨髓造血机能减退，机体的抗病力降低。至于核右移，乃骨髓造血功能衰退的标志，多由机体高度衰竭而引起，常提示预后宜慎重。
七、红细胞压积容量测定
红细胞压积容量（简称比容或P．C．V．）是将抗凝血装入特制的玻璃管中，以计
温氏红细胞压积
容量测定管
1.温氏管 2.充血用的长针头 |
算红细胞体积占全血体积的百分比，即为比容。
【器械】
（1）温氏（Wintrobe）管 管长110mm，内径3mm，管壁一侧自上而下标有0～10刻度，供测定血沉之用；另一侧自下而上标有0～10刻度，供测定比容时用。0～10之间共有100个刻度。
（2）长针头 选用封闭长针头（长15cm），针尾接以橡皮帽，供充液及冲洗温氏管用。
【试剂】10％EDTA二钠
【方法】
（1）用长针头吸取抗凝血，将针头插入温氏管底部，自下而上注入血液，至刻度“10”处为止。
（2）将此管置电动离心机内，以3,000r/min速度离心30min，使红细胞紧压于管之下端。读取红细胞柱的高度，即为红细胞压积值。
【正常值】各种健康家畜红细胞压积数值见表十一：
表十一 各种健康家畜红细胞压积数值
|
家畜种类 |
平均数值 |
变动范围 |
|
马
牛
羊
猪 |
35
35
39
34 |
30～40
28～42
32～46
25～40 |
【注意事项】
（1）所用的抗凝剂以EDTA二钠为佳，因它对红细胞的大小无影响。而草酸钾或枸橼酸钠可使红细胞皱缩，致使测得数值变小。
（2）充液时，注意防止在玻管中充入气泡。如有气泡，可将血液吸出，另行充液。
（3）清洗温氏管时，将管口朝下，插入连接自来水管的长针头，血液即可洗出。试管洗净后，干燥备用。
【临床意义】
比容增加：多为血液的液体成分减少而比容相对增加，可见于胃肠炎、肠便秘等。比容超过60％，说明血液高度浓稠。因此，比容的测定常可判断脱水的程度，以及确定输液量的多少。
比容减少：多为红细胞减少所致。结合红细胞计数及血红蛋白含量的测定，可计算出红细胞的平均体积，平均血红蛋白含量和饱和指数，有助于对贫血的鉴别诊断。
尿液检验不仅可以发现泌尿系统的疾病，而且可为临床诊断提供有关糖代谢障碍、肝功能和酸碱平衡紊乱等资料。常用检验项目包括用物理学方法，检查其物理性状，如尿色、透明度、气味、比重等；以化学方法，测定其反应、蛋白质、酮体及潜血；以及用显微镜检查尿沉渣。
一、尿液标本的采集和保存
可用清洁容器或集尿器搜集自然排出的尿液，必要时也可用导尿方法采取。采集的尿液标本应立即检验，如不能立即检验时，可加入少量防腐剂，如于l00ml供检尿中，加入福尔马林3～4滴或麝香草酚0.1g。
二、尿液物理性质的测定
尿液物理性质的检查包括尿色、透明度、气味、密度等。前三项详见第一章泌尿系统尿液的感观检查部分。
尿密度可用尿密度计测量之。
【方法】将尿液沿玻筒壁缓缓倒入特制的尿密度筒（或量筒）内，液面须离筒口约1/30m左右，且勿使液面产生泡沫，如有泡沫，应以滤纸除去。然后将尿密度计小心地放入盛尿的量筒中，勿使与筒壁、筒底相接触，而应漂浮于尿液中，待密度计稳定后，自液面读取密度计的相应刻度数，即为测得的尿密度。
若尿量太少不便测量时，可将尿液用常水等量或数倍量稀释后测定，然后将测得的密度值的最后两位数乘以稀释倍数，即得尿液的真正密度。
尿密度计上的刻度，是以尿温15℃为标准而制定的。故当尿温每高于标准温度3℃时，密度应增加0.001；反之，每低3℃时，应减0.001。
【正常值】健康家畜尿密度变动范围如下：
猪：1.018～1.022 马：1.025～1.055
牛：1.025～1.050 羊：1.015～1.070
健康家畜尿液密度的大小，与尿中固体物质的含量成正比，其中影响最大的是尿素和氯化钠。
一般尿比重值与排尿量呈反比。尿密度降低，可见于引起尿量增多的各种疾病；尿比重升高，多见于引起尿量减少的各种疾病。
三、尿液的化学检验
1.尿的反应
【方法】最简便的方法是用pH试纸，一端蘸取少许尿液，然后与所附有的标准比色纸进行比色，其相应的数值即为供检尿的pH。
【尿液的反应及其病理变化】家畜尿液的反应，依饲料性质而有不同。草食动物正常为碱性，马尿的pH约为7.8，牛尿则约为8.7左右；而猪尿则依饲料性质为转移，或为碱性或呈酸性（喂富蛋白质饲料时呈酸性反应；喂给植物性饲料时呈碱性反应）。
草食动物尿呈酸性反应，可见于高热性疾病、佝偻病、骨软症及长期饥饿；其碱性增高多由于膀胱炎、尿道阻塞而引起尿液的氨发酵所致。
2.尿中蛋白质的测定
（1）煮沸法 本法最简便。
【原理】蛋白质遇热发生凝固而出现混浊。
【方法】取中试管一支，加供检尿（如为碱性尿，需加少许10％醋酸，使之成为弱酸性）5～10ml，于酒精灯上加热至沸，如呈白色混浊或出现絮状沉淀，则为蛋白尿阳性。
为区别由碳酸盐或磷酸盐而生成的假阳性混浊现象，可滴加醋酸溶液数滴。若滴酸后混浊消失，为假阳性反应；若滴酸后不消失并混浊加重或产生沉淀，则为阳性反应。
（2）磺柳酸法（磺酸水杨酸法） 本法较灵敏。
【原理】磺柳酸为生物碱试剂，在酸性环境中，其阴性离子可与阳性电荷的蛋白质结合成不溶性的蛋白盐而沉淀。
【试剂】通常用20％磺柳酸溶液。在马也可用10％的磺柳酸溶液。
【方法】取滤过尿5m1于试管内，加20％磺柳酸溶液数滴，如尿中含有蛋白质或蛋白脎，即出现白色混浊或沉淀。由蛋白脎产生的混浊，于加热后可消失，放冷后重复出现。蛋白质沉淀加热也不消失。
（3）试纸法
【原理】根据指示剂的“蛋白质误差”的原理，在一定的pH条件下，由于尿中蛋白质的作用可使试纸条上的试剂产生绿色。阴性结果为黄色，根据尿中蛋白质含量的多少，阳性结果时可呈现黄绿、绿和蓝绿等不同颜色。
【试纸】市售的尿蛋白质检验试纸。在良好的存放条件下，有效期可达2～3年。
【方法】由试纸瓶中取出试纸条（取后立即扭紧瓶盖以防瓶内试纸受潮影响有效期），将试纸插入新鲜的未经离心的尿液中，立即取出试纸并在容器壁上沾去多余的尿液，迅速与瓶签上的标准比色板比色判定。
【注意】强碱性的尿液或混有洗必泰等消毒剂的尿液，可引起假阳性结果。因此，对强碱性尿，要用醋酸液调整其pH至弱酸性。
【临床意义】健康家畜的尿中，只有蛋白的痕迹，用一般方法难以检出，通常可认为不含蛋白。只当喂饲大量蛋白饲料或妊娠动物、新生幼畜等可呈现一时性蛋白尿。
病理性蛋白尿主要见于急性肾炎及肾病；此外，膀胱、尿道的炎症时亦可出现轻微的蛋白尿。
多数的急性热性传染病（猪瘟、猪丹毒、多种动物的流感、马腺疫、胸疫、传染性贫血以及梨形虫病、鼻疽、结核等病），某些饲料中毒时，也可出现蛋白尿。
3.尿中潜血的检验
若尿中仅有少量血液或血红蛋白，并不足以引起肉眼可见的颜色变化时称为潜血，可用化学方法检验之。
（1）联苯胺法
【原理】血红蛋白中的铁，具有过氧化酶的作用，可分解过氧化氢放出氧，使联苯胺氧化呈绿色或蓝色。
【试剂】联苯胺冰醋酸饱和液，3％过氧化氢溶液。
【方法】取供检尿3～5ml置洁净试管中煮沸，以破坏其他可能存在的过氧化酶。冷却后加入联苯胺冰醋酸饱和液数滴，再加3％过氧化氢溶液数滴，混合，数秒钟即可呈现反应。
如尿中含有磷酸盐类，再加联苯胺冰醋酸饱和液及过氧化氢，可发生乳白色沉淀，影响结果判定。此时可先将煮沸后的供检尿冷却，再滴加冰醋酸，使尿呈酸性为止。然后加乙醚3ml，加塞振摇之，静置片刻，醚层即分离。如醚层呈胶体状，可加乙醇数滴以促其分离（因在酸性条件下，尿内血红蛋白可溶于乙醚内）。
取滤纸一小片（滤纸应先试验，需不呈阳性反应者方可应用），滴加醚提出液数滴。待醚蒸发后，再滴加联苯胺冰醋酸饱和液数滴，稍待片刻，再滴加3%过氧化氢数滴即可。
【结果判定】若供检尿（或按上述处理后的滤纸）呈绿色或蓝色，为阳性反应。颜色的深度（绿、蓝绿、蓝色、深蓝），可表示反应的强弱（+、++、+++、++++）。若5min后仍不变色，则为阴性反应。
【注意事项】
过氧化氢必须新鲜。
玻璃器材必须十分清洁，否则可呈假阳性反应。
（2）过氧化钡法
【原理】基本同上法。仅以过氧化钡取代过氧化氢。
【试剂】
（1）固体试粉
过氧化钡 8份
联苯胺 1份
混合备用。
（2）冰醋酸
【方法】取载玻片1张，滴被检尿1滴（或以镜检后的尿液进行），加少量固体试粉（一刀尖），再滴加冰醋酸1～2滴，观察呈色反应。
【结果判定】同上法。
（3）试纸法
【原理】血红蛋白中的铁质具有过氧化酶的作用，使试药中的过氧化物分解，而邻一联甲苯胺氧化并呈蓝色或绿色。
【试纸】市售尿潜血试纸。本试纸选用邻一联甲苯胺作呈色剂，可避免联苯胺有致癌作用的缺点。
【方法】将试纸沾入尿中，按说明书规定的时间与标准比色版比色，判定结果。斑点状的绿色或蓝色说明尿中有完整的红细胞， 弥漫性的绿色或蓝色为血红蛋白或肌红蛋白。
【注意事项】
（1）比重增加、蛋白质增多或含5mg％以上抗坏血酸时，可使试纸的敏感性降低。
（2）混入某些氧化剂（如次氯酸盐）时，可引起假阳性结果。尿路感染时，细菌的过氧化酶也可引起假阳性结果（呈点状蓝色，容易误判为尿中有红细胞）。
【临床意义】尿中潜血反应阳性，可见于肾及尿路的出血性疾病；以及各种溶血性疾病（如焦虫病、牛的血红蛋白尿症、钩端螺旋体病、新生仔猪和骡驹的溶血病等）。
为区分血尿与血红蛋白尿，可按下表方法鉴别之：
表十二 血尿与血红蛋白尿的鉴别
|
鉴别方法 |
血尿 |
血红蛋白尿 |
|
肉眼观察
静止后
显微镜检查
屡次过滤 |
常混浊不透明
有红色沉淀
可发现完整红细胞
脱色 |
常透明
无红色沉淀
无完整红细胞
不脱色 |
4．尿中酮体的检验
酮体是β-羟丁酸、乙酰乙酸和丙酮的总称。它们都是脂肪代谢的中间产物，当大量脂肪分解而导致这些物质氧化不全时，可使血中浓度增高而由尿排出，称为酮尿。反刍兽患病时，应注意检验尿中有无酮体。
（1）郎（Lange）氏法
【原理】丙酮或乙酰乙酸与亚硝基铁氰化钠作用后，再与氨液接触可产生紫红色化合物，冰醋酸可抑制肌酐产生类似的反应。
【试剂】
亚硝基铁氰化钠
冰醋酸
浓氨水（28％）
【方法】取被检尿约2ml于小试管内，加入亚硝基铁氰化钠结晶数小粒，振荡使其溶解，再加冰醋酸0.2ml（3～4滴），混匀后，将试管倾斜，沿管壁缓缓加入浓氨水0.5～lml，在两液交界处呈现紫红色环即为阳性。判定结果时根据颜色产生的时间，可作粗定量判断。立即出现深紫红色环（+++）；逐渐出现紫红色环（++）；10min内出现淡紫色环（+）；10min后不显色（—）。
（2）改良罗特拉（Rothera）氏法
【原理】丙酮和乙酰乙酸在一定的pH环境中，与亚硝基铁氰化钠及硫酸铵作用，形成紫色化合物。
【试剂】改良罗氏粉剂
亚硝基铁氰化 0.5g
无水碳酸钠 10.0g
硫酸铵 20.0g
将上述三种药物研磨混匀（不宜太细），贮于棕色瓶中备用。若放置过久变黄，说明已失效。
【方法】取粉剂约0.1g于载玻片上或反应盘内，加新鲜尿2～3滴使粉剂完全被尿液浸透。
【结果判定】粉剂呈紫红色为阳性反应，5min后仍不显色者为阴性。根据显色快慢与色泽深浅亦可用（+～+++）号表示。
【注意事项】
① 尿内有多量非晶形尿酸盐及肌酐时，可出现棕色或橙色反应。
② 丙酮含量不多时，阳性反应出现较慢，故必须观察5～l0min后，才能作最后判定。
③ 阳性反应为紫色或紫红色，如仅呈红色或红棕色者应判为阴性。
④ 氨容易挥发，氨水瓶用过后必须盖紧，如使用过久或氨气味太淡，将导致假阴性结果。
⑤ 上述两法均不能检出β-羟丁酸。
⑥ 粉剂亦可用于检验牛奶中的酮体（方法相同）。
（3）试纸法
市售酮体试纸可按说明书使用。
四、尿沉渣的检查
尿沉渣的成分主要有两类：无机沉渣多为各种盐类结晶；有机沉渣包括红细胞、白细胞、上皮细胞、管型（尿圆柱）及微生物等。
尿沉渣，特别是有机沉渣，在泌尿器官疾病的诊断上有重要的意义。
1、尿沉渣标本的制作和镜检
（1）取新鲜混匀的尿液约l0ml于试管内，以2,000r/min的速度离心沉淀3～5min，或任其自然沉淀。标本为明显脓尿或血尿时，则不必离心，但应注明未离心沉淀。
（2）离心沉淀后吸出上清液于另一试管中（作蛋白质测定用），沉淀管内剩余约0.2ml，摇匀沉渣，倾于玻片上加盖片后镜检。
（3）先用低倍镜将涂片全面观察一遍，寻找有无细胞、管型及结晶。再用高倍镜仔细辨认。光线应用弱光，过强时可使透明管型漏检。
（4）检查细胞至少应观察10个高倍镜视野，管型至少应观察20个低倍镜视野。
（5）报告方法 细胞以高倍视野所见最低和最高数字表示，如白细胞0～5个/高倍视野，也可用符号（+～++++）表示。管型以低倍视野所见最低和最高数字表示，如透明管型0～1个/低倍视野，或用符号（+～++++）表示。
（6）每次操作步骤，如离心沉淀的尿量、离心速度、时间和上清液剩余的量，以及检查视野数等均应做到一致，便于前后比较，有助于观察病情变化。
2、尿沉渣中的细胞成分
红细胞 新鲜红细胞为淡黄绿色，略有折光性，在高渗尿内可皱编成桑椹形或星状，在低渗尿内则胀大，甚至可使血红蛋白溢出，成为大小不同的空环形，称红细胞淡影。
正常尿中很少见到红细胞。若超过4～5个/高倍视野，而尿的外观无血色者，称为镜下血尿。见于急性或慢性肾小球肾炎、急性膀胱炎、肾结石、肾盂肾炎等。
白细胞 尿中白细胞主要为中性粒细胞，胞浆清晰整齐，在新鲜酸性尿中，或加1%醋酸处理后，则可见到清晰的细胞核。白细胞退化变性后，外形多不规整，胞浆内充满颗粒，常将核覆盖而看不到时，称脓细胞。
正常尿中可有少量白细胞。如超过5～8个/高倍视野时，说明泌尿器官有炎症。如尿中出现大量白细胞或脓细胞，说明泌尿器官有化脓性炎症或脓肿破裂。
上皮细胞 其来源不同，形态亦各异。
（1）肾上皮细胞
【形态】呈圆形或多边形，大小近似白细胞或比白细胞略大1/3，含有一个大而圆形的核，胞浆内含小颗粒。
图9.尿沉渣中的上皮细胞
1.肾上皮 2.尿路上皮 3.肾盂上皮（高脚杯形）
4.膀胱上皮 |
【临床意义】肾上皮细胞主要来自肾小管。正常尿液中可能有少量出现。当肾小球肾炎时可大量出现，其细胞内并可含脂肪滴。
（2）尿路上皮及肾盂上皮
【形态】尿路上皮约比白细胞大2～4倍，形态不一，可呈梨形、梭形或带尾形，尿路上皮常有一圆形或椭圆形的较大的核；有呈典型的高脚杯形者为肾盂上皮细胞。
【临床意义】尿路上皮细胞来自肾盂、输尿管及膀胱颈部，高脚杯形的细胞主要来自肾盂，这些细胞大量出现时，表示尿路黏膜的炎症比较严重。
（3）扁平上皮细胞（膀胱上皮）
【形态】表层为大而扁平，中层为纺锤形，深层为圆形的细胞含有小而明显的圆或椭圆形的核。
【临床意义】此细胞来自膀胱、尿道浅层。大量出现为膀胱或尿道黏膜的表层有炎症。
管型（尿圆柱） 管型是蛋白质在肾小管内凝聚而成的圆柱状物体，当尿内有多量管型出现时，表示肾实质有病理性变化。
图12.尿沉渣
上半：酸性尿中无机沉渣 1.草酸钙 2.硫酸钙 3.尿酸
下半：病理性尿沉渣 I.亮氨酸 II.酪氨酸 III.胆固醇 |
图10.尿沉渣中各种管型的模式图
1.透明管型 2.上皮管型 3.颗粒管型 4.血细胞管型
5.脂肪管型 6.混合管型 7.腊样管型 |
图11.碱性尿中的无机沉渣
1.磷酸铵镁 2.磷酸钙 3.马尿酸 4.尿酸铵
5.磷酸盐 6.碳酸钙 |
根据管型的构造不同，又可分为许多种，如透明管型、颗粒管型、脂肪管型、蜡样管型、细胞管型等。细胞管型中又有红细胞、白细胞、上皮细胞等管型。下面对常见管型的形态及临床意义介绍如下。
① 透明管型 为无色透明内部结构均匀的圆柱状体，两边平行，两端钝圆，偶而含有少量细颗粒。因其透明度大易被忽略，需在弱光下观察。尿中多量出现时，说明肾实质有轻度病变。
② 颗粒管型 管型内含有颗粒，其量超过1/3时，称颗粒管型。根据颗粒的大小，又分为粗颗粒与细颗粒两种类型。细颗粒管型见于慢性肾炎或急性肾炎后期。粗颗粒管型见于慢性肾小球肾炎或某些原因引起的肾小管损伤时。
③ 细胞管型 红细胞与白细胞管型的意义与尿中细胞成分的意义相同。上皮细胞管型表示有肾小管病变，常见于急性肾炎、重金属和化学物质中毒时。
④ 脂肪管型 管型内有多量大小不等，圆形折光性强的脂肪滴。见于慢性肾炎及类脂性肾病。
⑤ 蜡样管型 常呈浅灰色或蜡黄色、有折光性、质较厚、外形宽大、易断裂、断端呈直角、边缘常有缺口，有时呈扭曲状。表示肾脏有长期而严重的病变。
无机沉渣 正常时，马尿中的无机沉渣较多。
碱性尿中的无机沉渣主要为碳酸钙；酸性尿中的无机沉渣，则主要为草酸钙。
磷酸铵镁（三重磷酸盐）呈无色、两端带有斜面的三棱柱状体。如新鲜尿中多量出现，可提示膀胱炎或肾盂炎。
尿中无机沉渣的检查，对尿结石的早期诊断有一定意义。
实习三 瘤胃内容物的检查
瘤胃内容物的检验内容主要有一般感观检查、pH测定和纤毛虫检查等。
一、瘤胃内容物的采取
用量较少时，可用长针头在左侧饥窝部穿刺抽取。亦可在反刍时，用手将刚吐出的食团由口腔内取出，榨取瘤胃液。
用量较多或动物反刍废绝时，一般都要通过插入胃导管抽取。由口腔插入粗口径的胃导管，确证进入瘤胃内后，将牛头压低用唧筒抽吸，有时亦可自行流出。特制的细胃导管，长2.5m，直径1.5cm，在其前端约40cm部分有许多直径约5mm的侧孔，抽吸时不易为饲料堵塞。抽取后的瘤胃内容物，在一般感观检查后，可用二层纱布滤去粗纤维，作为检查纤毛虫用。
二、一般感观检查
1.气味 正常时具有芳香气味。瘤胃酸中毒时，由于乳酸增多，常呈酸臭。氨过多时，有腐败臭。
2.颜色 正常为淡绿色或绿色，以青贮料为主时，呈黄褐色。瘤胃酸中毒时，常呈乳灰白色。
3.黏稠度 正常瘤胃液有一定的黏稠度。在瘤胃酸中毒和第四胃移位时，常呈稀薄水样。
三、酸碱度的测定
取新采集的瘤胃液，先用广范围pH试纸，后用精密pH试纸测定。正常瘤胃液的pH约在6.5～7.5之间，低于6.5或高于7.5时，应考虑为异常。pH6.0以下或8.0以上，应考虑乳酸过多或氨过多。瘤胃酸中毒时pH可降至4.0～4.8。
四、纤毛虫检查
1.纤毛虫活力检查
【方法】取新采集的瘤胃液，用两层纱布滤过后，滴在载玻片上涂成薄层后，用低倍镜观察10个视野，计算每个视野中纤毛虫的平均数，并计算其中有活动力的纤毛虫百分数。采集后的纤毛虫，由于受温度的影响，其活力逐渐下降，最好使用显微镜保温装置，如无条件时，可将玻片在酒精灯上稍加温后立即镜检。
【结果】一般认为采取后直至45min，其活力为4.6～5.0％。
2.纤毛虫计数
【方法】有条件时应用特制加深的血细胞计数板，一般情况下可利用普通的血细胞计数板加以改制（即在计数板两侧凸起部沾以薄玻片，使计数池深度达0.5或1.0mm）。将滤过的瘤胃液直接滴在计数板上，再加上盖片，按白细胞计数法计数。但计算时不应乘稀释倍数，并应换算为每毫升瘤胃液中的纤毛虫数。
【结果】正常时每毫升瘤胃液中约含40万个纤毛虫，如低于1万个，即可提示为消化器官疾病或消化功能紊乱。
五、纤维素消化试验
1．器材与试剂
（1）器材 小铅锤（可用螺母代替）、棉线或纯纤维素、烧杯。
（2）试剂 10％葡萄糖溶液。
2．操作方法
（1）纤维素法 取10ml瘤胃过滤液，加10％葡萄糖0.2ml，再加入1g纯纤维素，置于39℃水溶液中，静置，观察纤维素消化时间。健康牛为48～54h，若大于60h，说明消化机能减退。
（2）挂线法 棉线1根，一端拴上小铅锤，悬挂于瘤胃过滤液中，观察棉线消化的时间。
